Il ricombinante umano dell'albumina HA è strutturalmente e biochimicamente equivalente a pHSA

L'albumina umana recombinante HA è strutturalmente e biochimicamente equivalente a pHSA

Descrizione

L'albumina umana recombinante di Healthgen Biotech è liberamente origine animale, che efficacemente evitano tutto il rischio potenziale di contaminanti animali, di batteri, di prioni, di virus e di malattia contagiosa della proteina. La piattaforma specifica di espressione dell'endosperma del riso è facile da essere su grande scala. L'endosperma del riso ha il corpo della proteina, che può tiene la stabilità e la bioattività delle proteine. Attualmente, la capacità di produzione è di quasi 1000 chilogrammi/anno.

OsrHSA è strutturalmente e biochimicamente equivalente a pHSA.

Il OsrHSA espresso ha la stessi massa molecolare, sequenza aminoacidica, estremità di C e di n e punto di fusione come pHSA. Lo spettro circolare di dicroismo (CD) di OsrHSA nella regione quasi- e lontano-UV ha abbinato che di pHSA, indicando che sia la struttura secondaria che terziaria di OsrHSA è identica a quelle di pHSA. L'analisi spettroscopica più ulteriormente ha confermato che OsrHSA ha la stessa conformazione del pHSA.

Per caratterizzare la struttura di OsrHSA, un complesso acido OsrHSA-miristico è stato cristallizzato e la struttura è stata risolta dalla sostituzione molecolare facendo uso precedentemente del risoluto HA struttura ad un perfezionamento di 2,5 Å (codice di identificazione di PDB 1BJ5), presentante un valore senza r finale di 0,303. Un cristallo di due molecole indipendenti di OsrHSA è stato ottenuto in unità asimmetrica. La struttura globale di OsrHSA è una forma del cuore costituita da tre dominii elicoidali, ha designato la I, II ed III e con gli acidi miristici limitati alle cavità idrofobe. Una sovrapposizione di tutti gli atomi del α-carbonio dei sistemi cristallini di OsrHSA e di pHSA ha provocato un rmsd di 0,67 Å per il codice di identificazione di PBD 2I2Z e di 0,69 Å per 1BJ5.

Nessuna differenza ovvia nelle conformazioni della principale-catena è stata identificata fra pHSA e OsrHSA, che dimostra che OsrHSA in cellule dell'endosperma del riso è piegato nella struttura identica come pHSA nel plasma sanguigno. Come previsto, 17 legami bisolfurico sono stati identificati come legami bisolfurico genuini e un residuo libero della cisteina (Cys) è stato osservato alla posizione 34. HA è conosciuto per fungere da proteina di trasportatore, pricipalmente attraverso due siti di messa in bacino per le droghe e 7-9 siti per gli acidi grassi (27). Otto acidi miristici sono stati osservati che limitato al ricombinante HA molecola e tutte le sedi del legame di acido grasso in OsrHSA sono state identificate alle stesse posizioni di nel pHSA. Due siti drugbinding trovati nel pHSA erano inoltre presenti in OsrHSA. Il sito I è una cavità idrofoba situata in sottodominio II, delineato dai residui F211, W214, A215 e L238. Due mazzi dei residui polari responsabili di interazione del legante sono stati popolati dagli aminoacidi Y150, H242, R257 e K195, K199, R218, R222, rispettivamente. Il sito II era un'altra tasca idrofoba in sottodominio IIIA composto di L387, di Y411, di L453, di V433 e di L430. Una regione polare, composta di R410, K414 e S489, è stata trovata in questa sede del legame. La topologia strutturale di queste sedi del legame in OsrHSA suggerisce che possa eseguire le stesse funzioni biologiche del pHSA.