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Fonte: | Lievito (Pichiapastoris) | Gene Source: | Album di Parengyodontium |
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Aspetto fisico: | Polvere liofilizzata sciolta bianchiccia | Formulazione: | Polvere liofilizzata |
Attività: | Più di 30U/mg | Stoccaggio e trattare: | Immagazzinato alle temperature 2-8℃ per 24 mesi |
Evidenziare: | Alta proteinasi K di bioattività,Polvere della proteinasi K,Polvere della proteinasi K del RNA e del DNA |
Alta proteinasi K di bioattività per purificazione del RNA e del DNA
Descrizione
La proteinasi K è un membro tipico della famiglia della subtilisina delle proteinasi. Consiste di 278 aminoacidi, con 29kDa di massa molecolare ed il pi è 8,9. La proteinasi K è un'endopeptidasi e porta al suo sito attivo la triade catalitica Asp39, His69, Ser224. Il suo enzimatico pieno attivato da calcio, l'enzima digerisce preferenziale le proteine dopo gli aminoacidi idrofobi. Sebbene gli ioni del calcio non colpiscano l'attività enzimatica, contribuiscono alla sua stabilità. Le proteine completamente si digeriranno se il tempo di incubazione è lungo ed il livello di concentrazione nella proteasi abbastanza. La proteinasi K è inoltre stabile sopra un'ampia gamma di pH (4-12), con un optimum di pH di pH 8,0. Un'elevazione della temperatura della reazione da °C 37 a °C 50-60 può aumentare l'attività parecchie volte, come l'aggiunta di 0.5-1% (SDS) o il cloruro di Guanidinium, il tiocianato di Guanidinium e l'urea.
La proteinasi recombinante K (rProK) è derivata da lievito basato sul gene ottimizzato dell'album di Engyodontium dalla mutazione sito-diretta. È purificata tramite il processo della cromatografia. Il rProK è completamente esente dalle attività della RNAsi e della dnasi. L'attività biologica è più di 30U/mg, quale l'unità è definita come la quantità di enzima che idrolizzerà l'emoglobina urea-denaturata per produrre il colore equivalente alla tirosina di µmol 1,0 al min a 37°C, pH 7,5 (colore dal reagente della folina-Ciocalteu).
Durante la purificazione del RNA e del DNA, ci sono molte proteine di contaminazione presenti. Questi contaminanti devono essere rimossi. La proteinasi K, che è una vasta proteasi della serina di spettro, è utilizzata in molti protocolli di purificazione del RNA e del DNA per digerire queste proteine di contaminazione. L'aggiunta di proteinasi K alle preparazioni acide nucleiche rapidamente inattiva la nucleasi che possono degradare altrimenti il DNA o il RNA durante la purificazione.
Rispetto alla proteinasi K dell'altro fornitore, il rProK di Healthgen Biotech ha risultato comparabile.
La proteinasi recombianant K (rProK) di Healthgen Biotech ha sia la polvere liofilizzata che liquido. Per la polvere liofilizzata, non ci sono tutti gli additivi.
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